Enteritis Ag (Rota, Corona, K99)
Test ELISA per la ricerca degli antigeni di Rotavirus, Coronavirus ed Escherichia coli K99 nelle feci bovine
I problemi di diarrea nel vitello sono spesso causati da Rotavirus, Coronavirus o E. coli K99. Questi problemi possono portare a importanti perdite economiche poiché gli animali colpiti generalmente mostrano un ridotto aumento di peso, che a volte porta alla morte. La rapida identificazione dell’agente patogeno coinvolto aiuta nel controllo della malattia. Si raccomanda di testare le feci di almeno 3 vitelli per mandria infetta durante l’evoluzione dei sintomi.
I campioni di feci vengono diluiti e incubati in pozzetti rivestiti con una miscela di 3 anticorpi (Abs) specifici per rotavirus, coronavirus ed E. coli K99. Se uno di questi agenti patogeni è presente nei campioni di feci, si legherà al suo Ab specifico già nei pozzetti. Dopo diversi lavaggi per eliminare le sostanze non legate, viene aggiunto un coniugato (un Ab accoppiato a un enzima) mirato a rotavirus, coronavirus o E. coli K99. Dopo l’incubazione, l’eccesso di questo coniugato viene eliminato mediante un secondo lavaggio e il suo legame con il patogeno specifico viene rivelato con un substrato cromogeno. Dopo questa incubazione, l’enzima, se presente, reagisce con il substrato e si sviluppa una colorazione blu. L’intensità del colore consente la determinazione del tipo di campione testato. Un campione negativo mostrerà una reazione debole (incolore, blu pallido) mentre un campione positivo mostrerà una reazione più forte di quella del controllo negativo (blu più scuro del controllo negativo).
Materiali richiesti ma non forniti:
- Acqua purificata
- Provette per la diluizione del campione
- Contenitori per la diluizione di altre soluzioni
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Reagenti forniti con il kit:
- 1 x 12 strisce da 8 pozzetti rivestiti con una miscela di 3 Ab specifici per rotavirus, coronavirus ed E. coli K99
- 1 x 2 ml Controllo positivo pronto all’uso (giallo scuro)
- 1 x 2 ml Controllo negativo pronto all’uso (giallo chiaro)
- 1 x 200 ml Tampone di diluizione pronto all’uso
- 1 x 20 ml Soluzione di lavaggio concentrata (50X)
- 1 x 8,5 ml Coniugato anti-rotavirus pronto all’uso (rosso)
- 1 x 8,5 ml Coniugato anti-coronavirus pronto all’uso (blu)
- 1 x 8,5 ml Anti-E. coli coniugato K99 (verde)
- 1 x 14 ml di substrato A
- 1 x 4 ml di substrato B
- 1 pipetta da 3 ml
- 30 pipette da 1 ml
