Swinecheck APP 1-9-11
Test immunoenzimatico per la rilevazione di anticorpi contro Actinobacillus pleuropneumoniae sierotipi 1, 9, 11 nel siero suino.
La pleuropolmonite causata da Actinobacillus pleuropneumoniae sierotipi 1, 9, 11 è un’importante malattia dei suini che può causare notevoli perdite economiche. Gli allevamenti sono spesso cronicamente infetti senza sintomi clinici. Tuttavia, a seguito di una situazione stressante, possono verificarsi diversi casi clinici con mortalità. Poiché la trasmissione orizzontale attraverso le vie aeree è piuttosto importante e l’infezione è solitamente inapparente, la sierologia diventa uno strumento indispensabile per la sua rilevazione.
I campioni di siero suino e i controlli vengono diluiti e incubati in pozzetti rivestiti con antigeni (Ags) di Actinobacillus pleuropneumoniae sierotipi 1, 9, 11 (APP 1, 9, 11). Gli anticorpi (Abs) specifici per APP 1, 9, 11 presenti nei campioni di siero positivi si legheranno agli Ag nei pozzetti. Dopo diversi lavaggi per eliminare le sostanze non legate, viene aggiunto un coniugato (un Ab accoppiato a un enzima) mirato all’Abs suino. Dopo l’incubazione, l’eccesso di questo coniugato viene eliminato mediante un secondo lavaggio e il suo legame viene rivelato con un substrato cromogeno. Dopo questa incubazione, l’enzima, se presente, reagisce con il substrato e si sviluppa una colorazione verde. La reazione viene quindi arrestata e vengono lette le densità ottiche. L’intensità del colore consente la determinazione del tipo di campione testato. Un campione negativo mostrerà una reazione debole (verde chiaro) mentre un campione fortemente positivo mostrerà una reazione forte (verde scuro). Tutte le sfumature di verde tra scuro e pallido rappresentano vari gradi di positività.
Materiali richiesti ma non forniti:
- Acqua purificata
- Micropipette regolabili monocanale e multicanale
- Puntali per micropipette monouso
- Lavatore per micropiastre ELISA
- Provette per la diluizione del campione
- Lettore di micropiastre ELISA a 96 pozzetti dotato di filtro da 405 nm
- Contenitori per la diluizione di altre soluzioni
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Reagenti forniti con il kit:
- 2 x 12 strisce da 8 pozzetti rivestiti con antigeni APP 1, 9, 11
- 1 x 2,5 ml Controllo positivo pronto all’uso
- 1 x 2,5 ml Controllo negativo pronto all’uso
- 1 x 50 μL Coniugato concentrato
- 2 X 100 mL Soluzione di lavaggio concentrata (10X)
- 1 x 24 ml Substrato pronto all’uso
- 1 x 24 ml Soluzione d’arresto pronta all’uso
